
层粘连蛋白是组成细胞外基质(ECM)的糖蛋白,参与细胞粘附、迁移和增殖等。此外,层粘连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白等被认为是基底膜(Basement membrane)的主要组成成分。FUJIFILM Wako可提供多重染色用的豚鼠抗层粘连蛋白抗体。
层粘连蛋白(Laminin)是一种分子量约为900 kDa的糖蛋白,由α、β和γ三个糖链聚集在一起形成十字结构。α链、β链和γ链分别存在多个分子种类,层粘连蛋白的类型根据其组合方式来命名(例如,α1、β1和γ1组成的层粘连蛋白称为层粘连蛋白-111)。
层粘连蛋白是众所周知的细胞外基质 (ECM) ,已知参与细胞粘附、迁移和增殖。特别是,层粘连蛋白和IV型胶原蛋白被认为是基底膜的主要成分。
在中枢神经系中,层粘连蛋白几乎只在血管周边的基底膜中表达,被用作血管的标志物。既往的研究显示,脑血管基底膜内层(内皮侧)含有层粘连蛋白-411和-511,而外层(脑实质侧)含有层粘连蛋白-211和-1111),参与血脑屏障(BBB: Blood-Brain Barrier)的形成与功能。
“抗层粘连蛋白,豚鼠”是豚鼠来源的层粘连蛋白多克隆抗体,可用于免疫组织染色中的多重染色2-6)。

层粘连蛋白的基本构造
根据文献1)绘制
参考文献
1. Halder, S. K. et al.: Neural Regen. Res., 18(12), 2557(2023).
2. Morita, S. et al.: Cell Tissue Res., 363, 497(2016).
3. Nishikawa, K. et al.: J. Neuroendocrinol., 29(2), (2017).
4. Takagi, S. et al.: J. Neuroimmunol., 331, 74(2019).
5. Muneoka, S. et al.: J. Neuroimmunol., 331, 58(2019).
6. Murayama, S. et al.: J. Neuroimmunol., 334, 576973(2019).
抗体信息
抗体种类 |
多克隆抗体 |
抗原 |
从Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的基底膜中分离的层粘连蛋白 |
免疫动物 |
豚鼠 |
组成 |
使用PBS稀释抗血清 |
标记 |
未标记 |
交叉性 |
小鼠、大鼠 |
应用 |
免疫组织化学染色(冰冻切片)1:500 (※ 推荐后固定时间为6h) |
Protocol(示例)
01
灌注固定:使用0.1%柠檬酸钠/PBS灌注除血后,4% PFA灌注
02
后固定:4% PFA (推荐6 h)
03
蔗糖替换:30%蔗糖/PBS(4℃,过夜~约2天)
04
制备冰冻切片:去除蔗糖后,制备冰冻包埋块,并用低温切片机制备30 μm厚的切片
05
甘氨酸处理:25 mM甘氨酸PBS(20 min左右)
06
封闭:5% 正常山羊血清,0.3% Triton X-100/PBS(4℃,过夜)
07
一抗:抗层粘连蛋白, 豚鼠(1︰500),1% 正常山羊血清,0.3% TritonX-100/PBS(4℃,过夜~2 天)
08
清洗:0.3% TritonX-100/PBS(5 min×3次)
09
二抗:Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (1:500) (产品编号:568-77901),1% 正常山羊血清,0.3% TritonX-100/PBS(室温,2 h)
10
清洗:0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
11
封装:4℃下避光存储
性能数据

物种:小鼠
部位:海马体
样品:冰冻切片
抗体浓度:1:500
数据提供:京都工艺纤维大学 应用生物学系 宮田老师
物种:小鼠
部位:延髓最后区
样品:冰冻切片
抗体浓度:1:500
数据提供:京都工艺纤维大学 应用生物学系 宮田老师
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